عنوان
|
خالص سازی جزئی آسپاراژیناز از کبد اردک موسکووی
|
نوع پژوهش
|
مقاله ارائه شده
|
کلیدواژهها
|
خالص سازی جزئی، معرف نسلر، پارامترهای سنتیکی
|
چکیده
|
آسپاراژیناز آنزیمی است که هیدرولیز آسپاراژین به آسپارتیک اسید را کاتالیز می کند. آسپاراژینازها به طور طبیعی توسط میکروارگانیسم ها تولید می گردند. هر دو سوبسترا و محصول این آنزیم طی واکنش صورت گرفته، در متابولیسم اکثر موجودات نقش مهمی را ایفا می کند. از جمله عملکرد های فیزیولوژیک ارزشمند این آنزیم، کنترل بیان و فعالیت های سلولی مناسب در ایجاد تعادل بین اسید های آمینه بدن می باشد. علاوه بر آن آنزیم ال آسپاراژیناز نقش مهمی در درمان لوسمی لنفوبلاستی حاد ایفا می کند. هدف این تحقیق بررسی خصوصیات سینتیکی آنزیم آسپاراژیناز کبد اردک موسکووی و تأثیر پارامتر های مختلف بر فعالیت این آنزیم است. در این پژوهش آنزیم آسپاراژیناز از کبد اردک موسکووی با استفاده از روش های هموژنیزاسیون در بافر تریس pH 5/8، سانتریفیوژ، رسوب دهی با آمونیوم سولفات 20 و 60 درصد و دیالیز در دمای3 درجه سانتیگراد، به صورت جزئی جداسازی شد. بعد از استخراج فعالیت آنزیم طبق روش ریستون با معرف نسلر تخمین زده شد. در این تحقیق فعالیت ویژه آنزیم آسپاراژیناز جداسازی شده از کبد اردک U/mg 35/40 تعیین شد. pH بهینه آنزیم 7 و دمای بهینه آن 40 درجه سانتیگراد بدست آورده شد. مقادیر Km و Vmax آنزیم به ترتیب برابر 295/127 میلی مولار و639 /3 میلی مولاربردقیقه محاسبه شد. با توجه به عوارض جانبی آسپاراژیناز تهیه شده از منابع میکروبی استخراج و خالص سازی این آنزیم از سایر منابع از جمله کبد اردک موسکووی برای مطالعات آینده پیشنهاد می گردد.
|
پژوهشگران
|
فرشته میر محمدرضایی (نفر سوم)، محمدحسین آقابراری (نفر دوم)، مریم مهاجرانی (نفر اول)
|