عنوان
|
طراحی و سنتز پپتید ضد میکروبی موثر بر آنزیم آلژینات لیاز و بررسی اثر آن بر باکتری سودوموناس آئروژینوزا و تولید بیوفیلم
|
نوع پژوهش
|
پایان نامه
|
کلیدواژهها
|
پپتید ضد میکروبی، آلژینات لیاز، بیوفیلم، سودوموناس آئروژینوزا
|
چکیده
|
مقدمه: در سال های اخیر، ظهور اجتناب ناپذیر پاتوژنهای مقاوم به چند دارو، مشکلات جدی برای بشر ایجاد کرده است. یکی از عواملی که میتواند موجب مقاومت باکتری ها در برابر دارو شود، بیوفیلم ها هستند. در نتیجه تحقیقات برای غلبه بر مشکلات ناشی از این امر پپتیدهای ضد میکروبی را به عنوان جایگزینی برای داروهای معمولی معرفی کرده است. پپتیدهای ضد میکروبی، مولکولهای موثر دفاعی در موجودات زنده هستند. این پپتیدها در ارگانیسمهای مختلف شناسایی شدهاند و با استفاده از تکنیکهای مختلف به صورت مصنوعی توسعه یافتهاند. در این پژوهش ما سعی کردیم با کمک فرآیند داکینگ پپتید ضد میکروبی جدیدی برای مقابله با باکتری سودوموناس آئروژینوزا و بیوفیلم تولیدی آن طراحی و تولید کنیم. مواد و روش: در این روش به کمک فرآیند داکینگ یک پپتید ضد میکروبی جدید طراحی و ژن کد کننده ها درون وکتور pET-26 قرار گرفت و به داخل باکتری اشریشیا کولای سویه BL21 منتقل شد. سپس پپتید ضد میکروبی تحت القا IPTG در باکتری اشریشیا کولای تولید و توسط ستون تمایلی نیکل خالص شد. تاثیر پپتید خالص شده با استفاده تست های MIC، MBC، انتشار چاهک و تست ضد بیوفیلم سنجیده شد. یافته های پژوهش: این پپتید توانست در غلظت پایین 1 میکروگرم بر میلی لیتر، رشد باکتری را مهار کرده و در غلظت 1.64 میکروگرم بر میلی لیتر خاصیت باکتری کشی از خود نشان داد. همچنین با استفاده از روش انتشار چاهک مشخص شد این پپتید در غلضت 8 میکروگرم بر میلی لیتر در برابر باکتری های سودوموناس آئروژینوزا ، باکتری کلبسیلا پونومونیه، انترو کوکوس فکالیس، اشریشیا کلای و پروتئوس میرابیلیس خاصیت ضد میکروبی دارد. همچنین این پپتید خاصیت ضد بیوفیلمی را بصورت وابسته به دوز از خود نشان داد. نتیجه گیری: پپتید طراحی شده در پژوهش حاضر دارای پتانسیل بالایی در جلوگیری از رشد باکتری های گرم منفی می باشد. این باکتری همچنین با جلوگیری از تولید بیوفیلم توسط باکتری سودوموناس آئروژینوزا امیدبخش آینده پپتید های ضد میکروبی در فرآیند های درمانی و همچنین تاییدی بر کارآمدی تکنیک های بیوانفورماتیکی در طراحی دارو می باشد.
|
پژوهشگران
|
سلمان احمدی اسب چین (استاد مشاور)، علی طراوتی (استاد راهنما)، امید جزایری (استاد راهنما)، زهرا رجبی (دانشجو)
|