|
عنوان
|
خالصسازی نسبی استیلکولیناستراز گاو و مطالعه تاثیر عصارهی برخی از گیاهان دارویی بر پارامترهای سینیتیکی آن
|
|
نوع پژوهش
|
پایان نامه
|
|
کلیدواژه‌ها
|
استیل کولین استراز، خالص سازی، واکنش المن، پارامترهای سینتیکی، گیاهان دارویی
|
|
چکیده
|
عملکرد آنزیم استیلکولیناستراز ) AChE ( ، تسریع فرآیند هیدرولیز استیلکولین است. با توجه به اینکه در بیماری- هایی همچون آلزایمر سطح انتقال دهنده عصبی، استیلکولین کاهش مییابد بنابراین امروزه یکی از روشهای مهار پیشرفت این بیماری تجویز داروهای مهارکننده آنزیم کولین استراز ) AChEI ( میباشد. دستیابی به داروهایی با اثرات جانبی کمتر بخصوص با منشاء گیاهی هدف بسیاری از محققین میباشد. هدف این تحقیق بررسی خصوصیات سینتیکی آنزیم استیلکولیناستراز مغز گاو و تاثیر عصاره متانولی برخی گیاهان دارویی بر فعالیت این آنزیم است. در این پژوهش آنزیم استیلکولیناستراز از مغز تازه گاو با استفاده از روشهای هموژناسیون، سانتریفیوژ، رسوبدهی با آمونیوم سولفات و دیالیز در دمای 4 درجه سانتیگراد، به صورت نسبی جداسازی شد. در طی مراحل جداسازی فعالیت آنزیم طبق روش المن تخمین زده شد. سرعت تولید تیوکولین با پیگیری واکنش آن با دی تیو دی نیترو دی بنزوئیک اسید ) DTNB ( و تولید آنیون زردرنگ 2- نیترو 5- مرکاپتو بنزوئیک اسید در طول موج 412 نانومتر اندازهگیری شد. عصاره متانولی گیاهانی نظیر افوربیا هلیوسکوپیا ، افوربیا ویرگاتا، سرسم، انگیروم، وارنگ بو، کوتکوتو، لرگ، کاکیل، اناریجه،گزنه و لیلکی به روش خیساندن بدست آورده شد و در دستگاه تبخیرکن چرخان تغلیظ شد. میزان 26/ 13 و 66 /33 ،6/66 ،3/ اثرگذاری عصاره متانولی این گیاهان بر آنزیم استیل کولین استراز در غلظتهای 33 میکروگرم بر میلی لیتر بررسی شد.گالانتامین محلول در متانول نیز به عنوان کنترل مثبت استفاده شد. در این تحقیق فعالیت کل و فعالیت ویژه آنزیم استیل کولین استراز جداسازی شده از مغز گاو U 1143/78 و U/mg 4/11 تعیین شد. pH 7 و دمای بهینه آن 45 درجه سانتی گراد بدست آورده شد. مقادیر / بهینه آنزیم 5 mK و maxV آنزیم به 54 میلی مولار بر دقیقه به دست آورده شد. مطالعهی آنزیم استیلکولیناستراز به / 6 میلی مولار و 88 / ترتیب برابر 44 روش الکتروفورز با ژل پلی اکریل آمید سدیم دودسیل سولفات جرم مولکولی یک زیرواحد آن را 61 کیلودالتون 26/ نشان داد. در میان عصارهها، عصاره متانولی گیاه افوربیا هلیوسکوپیا، افوربیا ویرگاتا و وارنگ بو در غلظت 66 میکروگرم بر میلی لیتر اثرات مهاری قابل قبولی داشتهاند. لذا جداسازی و خالص سازی، اجزای فعال عصاره این گیاهان و تأثیر آنها بر روی آنزیم استیل کول
|
|
پژوهشگران
|
علیرضا نقی نژاد (استاد مشاور)، آرزو رسولی زاده (دانشجو)، مریم مهاجرانی (استاد راهنما)
|