مشخصات پژوهش

عنوان	تعیین پارامترهای بیوشمیایی آنزیم ال-آسپاراژیناز از کبد گاو در حضور عصاره گیاه بادرنجبویه
نوع پژوهش	مقاله ارائه شده
کلیدواژه‌ها	ال-آسپاراژین، نسلریزاسیون، آلکالوئیدها، استخراج
چکیده	آنزیم ال-آسپاراژیناز اسیدآمینه ی آسپاراژین را به آسپارتیک اسید و آمونیاک هیدرولیز می کند. ال-آسپاراژیناز دارای فعالیت ضدتوموری است و به عنوان عوامل شیمی درمانی پذیرفته شده است. این آنزیم برای درمان سرطان خون لنفوبلاستیک حاد کاربرد دارد. علاوه بر کاربرد درمانی نقش مهمی نیز در صنایع غذایی دارد و به عنوان عامل پردازنده ی غذا در کاهش سطح شکل گیری اکریل آمید، یک عامل سرطان زا، در طول تولید محصولات غذایی نشاسته ای می باشد. به منظور بررسی فعالیت و پارامترهای سینتیکی آنزیم آسپاراژیناز از منبع حیوانی و در حضور عصاره ی گیاه بادرنجبویه، کبد تازه ی گاو تهیه شد. 10 گرم کبد گاو با بافر تریس-HCl با استفاده از دستگاه هموژنایزر هموژن شد و از طریق رسوب دهی با استون 60 درصد، به طور جزئی خالص شد. گیاه بادرنجبویه (Melissa officinalis L) گیاهی چند ساله و معطر متعلق به خانواده نعناعیان (lamiacea) می باشد. این گیاه در ایران برای درمان تهوع، کم خونی، افسردگی، آسم و... کاربرد دارد. فعالیت آنزیم با استفاده از روش نسلریزاسیون، از طریق محاسبه ی آمونیاک آزاد شده در طول واکنش، مورد مطالعه قرار گرفت. در این مطالعه، غلظت پروتئین برای آنزیم خالص شدهmg/ml 5 به دست آمد. مقادیر فعالیت و فعالیت ویژه نیز برای آنزیم خالص شده به ترتیب برابر باU/ml 39/55 و U/mg 11 به دست آمد. به منظور استخراج عصاره آلکالوئیدی از گیاه دارویی بادرنجبویه، از حلال های مناسب شامل: اتیل استات، پترلیوم اتر و کلروفرم استفاده شد. عصاره ی حاصل با استفاده از دستگاه روتاری تغلیظ شد. فعالیت آنزیم در غلظت های مختلف محلول آسپاراژین، در زمان های 1 و 3 و 5 و 7 دقیقه زمان انکوباسیون، در حضور عصاره با غلظت های 3/0، 75/0 و 5/1 میکروگرم بر میکرو لیتر و بدون عصاره گیاهی مورد سنجش قرار گرفت. در نهایت نمودارهای میکائیلیس منتن و لاینویوربرگ آن ها رسم گردید. مقادیر Km و Vmax برای آن محاسبه شد. مقدار Km برابر با 38/0 میلی مولار و مقدار Vmax برابر با 0264/0 میلی مولار بر دقیقه به دست آمد. پس از بررسی پارامترهای Km و Vmax آنزیم ال-آسپاراژیناز در حضور عصاره ی گیاه بادرنجبویه، مشاهده شد که در غلظت های مختلف عصاره، مقدار Vmax کاهش و مقدار Km افزایش یافته است. بنابراین آلکالوییدهای موجود در گیاه بادرنجبویه دارای اثرات مهاری بر بروی آنزیم ال-آسپاراژیناز می
پژوهشگران	مریم مهاجرانی (نفر دوم)، مهین شیخ نیازی (نفر اول)