مریم مهاجرانی

استفاده از داروهای گیاهی سالیان زیادی است که در فرهنگ های گوناگون از سراسر دنیا برای درمان بیماری های مختلف رواج یافته است. مهار فعالیت دو آنزیم آلفا آمیلاز و آلفا گلوکوزیداز یکی از روش های موثر در پیشگیری از افزایش گلوکز خون در بیماران دیابتی می باشد. این تحقیق با هدف استخراج این دو آنزیم از غدد گوارشی حلزون قهوه ای مرکبات شمال ایران به طریق هموژنیزاسیون و سانتریفیوژ در دمای 4 درجه سانتیگراد انجام شد. عصاره غنی فلاونوئیدی میوه گیاه بامیه و ریشه بابا آدم استخراج شد و فعالیت هر دو آنزیم قبل و بعد از انکوباسیون با آنها اندازه گیری شد. اندازه گیری فلاونوئید کل به روش رنگ سنجی آلومینیوم کلرید انجام شد. میزان پروتئین موجود در عصاره آنزیمی استخراج شده 01/0 میلی گرم در میلی لیتر به دست آمد. بهینه فعالیت آنزیم آلفا آمیلاز استخراج شده در pH 4 و آلفا گلوکوزیداز در pH 2 مشخص شد. بیشینه پایداری آلفا آمیلاز و آلفا گلوکوزیداز به ترتیب در pH های 4 تا 5 و 2 تا 4 بود. همچنین دمای بهینه برای فعالیت هر دو آنزیم آلفا آمیلاز و آلفا گلوکوزیداز دمای 40 درجه ی سانتی گراد مشخص گردید در بررسی پایداری آنزیم ها، پایداری دمایی هر دو آنزیم در بازه دمایی 4 تا 35 درجه سانتی گراد مشخص شد. بررسی فعالیت آنزیم ها در حضور یون های فلزی نشان داد که افزایش دو برابری غلظت محلول های CaCl2 و MgCl2 فعالیت آلفاآمیلاز را افزایش داده، در حالی که این افزایش غلظت در محلول FeCl2 باعث کاهش فعالیت شد و در مجاورت KCl و NaCl بر فعالیت آلفا آمیلاز بی تاثیر بود. از طرفی با افزایش غلظت محلول های ذکر شده افزایش فعالیت آلفاگلوکوزیداز مشاهده گردید. پارامتر های سینتیکی آنزیم آلفا آمیلاز و آلفا گلوکوزیداز در مجاورت عصاره های غنی فلاونوئیدی گیاه بامیه و بابا آدم اندازه گیری شد و میزان تأثیر این عصاره ها بر فعالیت آنزیم آلفا آمیلاز و آلفا گلوکوزیداز تعیین گردید. و با استفاده از نمودار میکائلیس-منتن و لاینویور- برگ، مقادیر Km و Vmax برای آلفا آمیلاز به ترتیب 188/0 میلی مولار و 062/0 میلی مولار بر دقیقه، در مجاورت عصاره گیاه بامیه به ترتیب 312/0 میلی مولار و 0301/0 میلی مولار بر دقیقه و در مجاورت عصاره بابا آدم به ترتیب 0718/0 میلی مولار و 022/0ومیلی مولار بر دقیقه بدست آمد. مقادیر Km و Vmax برای آلفا گلوکوزیداز به ترتیب 5/1 میلی