فرشته میر محمدرضایی

آنزیم ال-آسپاراژیناز که به طور وسیع در طبیعت وجود دارد، در ترکیب با سایر داروها در درمان لوسمی لنفوسیتی حاد، لنفوسارکوم، ملانوسرکوم و انواع مختلف سرطان استفاده می شود. این آنزیم همچنین نقش مهمی در صنایع غذایی دارد و به عنوان عامل پردازنده ی غذا در کاهش سطح شکل گیری اکریل آمید (یک ترکیب سرطان زا) در طول تولید محصولات غذایی نشاسته ای می باشد. گیاهان دارویی جزو منابع طبیعی هستند که در طب سنتی و مدرن، جهت درمان بیماری های انسان مورد استفاده قرار می گیرند. در این مطالعه، پارامترهای سینتیکی آنزیم ال-آسپاراژیناز استخراج شده از کبد گاو در حضور عصاره آلکالوئیدی گیاهان بادرنجبویه، نعنا و پونه کوهی مورد بررسی قرار گرفت. بدین منظور، آنزیم آسپاراژیناز از کبد تازه گاو جداسازی شد. 10 گرم کبد گاو در 100 میلی لیتر بافر تریس-HCl با 6/8 pH=با استفاده از دستگاه هموژنایزر هموژن شد و سپس با دو روش رسوب گیری با آمونیوم سولفات و رسوب گیری با استون 60%، جداسازی نسبی آنزیم انجام شد. پس از بررسی فعالیت آنزیم استخراج شده به روش رسوب گیری با استون، با استفاده از روش نسلریزاسیون، مقادیر فعالیت و فعالیت ویژه به ترتیب برابر با U/ml 44/52 و U/mg 91/10 به دست آمد. دمای بهینه حدود 35 درجه سانتی گراد و pH بهینه حدود 8 به دست آمد. مقادیر Km و Vmax به ترتیب برابر باmM 45/0 و mM/min027/0 به دست آمد. استخراج عصاره آلکالوئیدی از گیاهان مذکور، با استفاده از حلال های اتیل استات، پترلیوم اتر و کلروفرم انجام شد و با استفاده از دستگاه روتاری تغلیظ شد. پس از انکوباسیون آنزیم با عصاره آلکالوئیدی گیاهان موردنظر به مدت 10 دقیقه، پارامترهای سینتیکی آنزیم بررسی شد. Km در حضور عصاره گیاه بادرنجبویه با غلظت های 3/0، 75/0 و 5/1 میکروگرم بر میکرولیتر به ترتیب برابر 96/0 ، 11/1 و 13/1 میلی مولار و Vmax نیز برابر 025/0، 018/0 و 012/0 میلی مولار بر دقیقه به دست آمد و Km در حضور عصاره گیاه نعنا برابر 35/0، 26/0 و 21/0 میلی مولار و Vmax نیز برابر 029/0، 03/0 و 041/0 میلی مولار بر دقیقه به دست آمد و Km در حضور عصاره گیاه پونه کوهی برابر 36/0 ، 35/0 و 35/0 میلی مولار و Vmax نیز برابر 029/0، 035/0 و 047/0 میلی مولار بر دقیقه به دست آمد. بنابراین عصاره آلکالوئیدی بادرنجبویه اثر مهارکنندگی و عصاره آلکالوئیدی گیاهان نعنا و پونه کوه