مشخصات پژوهش

عنوان	کشت فولیکول های استخراج شده از تخمدان موش نابالغ روی داربست سلول زدایی شده تخمدان موش بالغ و بررسی بیان ژن های Zp2 و Gdf9 به عنوان مارکرهای بلوغ اووسیت
نوع پژوهش	پایان نامه
کلیدواژه‌ها	فولیکولوژنز، اووسیت، گرانولوزا، داربست، ماتریکس خارج سلولی
چکیده	تحقیق در ارتباط با تاثیر سیستم های مختلف کشت فولیکول بر میزان بیان ژن های دخیل در بلوغ فولیکول، سبب درک بهتر روند فولیکولوژنز می گردد. درکشت دو بعدی فولیکول های نابالغ، سلول های گرانولوزا در طول نمو از اطراف تخمک مهاجرت کرده که این امر خود سبب تغییر مورفولوژی فضایی فولیکول های تخمدانی، کاهش کیفیت تخمک و تغییر بیان ژن های مرتبط با بلوغ فولیکول می گردد. سیستم های کشت سه بعدی با داشتن مزیت هایی از جمله حفظ ارتباطات میان تخمک با سلولهای گرانولوزا و همچنین سلولهای گرانولوزا با ماتریکس استرومای اطراف، فراهم کردن شرایط مناسب برای فولیکول جهت بلوغ موفقیت آمیز، ممانعت از تخریب ارتباطات سلولی، حفظ بیان ژنهای دخیل در حفظ ارتباطات سلولی به عنوان یک روش مناسب جهت کشت فولیکول معرفی گردیدند. هدف از این مطالعه ایجاد داربستی مناسب به منظور کشت سه بعدی فولیکول می باشد، که علاوه بر دارا بودن مزایای ذکر شده و غیر سمی بودن برای فولیکول، ساختاری یکسان با ماتریکس خارج سلولی دارد که این امر به تنهایی می تواند عامل تعیین کننده ای جهت انتخاب این داربست به منظور پیوند به بدن موجود زنده باشد. مقایسه ی موفولوژی بین فولیکول های کشت داده شده به دو روش کشت دو بعدی و سه بعدی از طریق رنگ آمیزی و تهیه ی تصاویر میکروسکوپی صورت گرفت. در ادامه به منظور بررسی بیان ژن های مرتبط با بلوغ فولیکول، استخراج RNA صورت گرفت و از روی آنها cDNA سنتز شد. در نهایت به روش Real time RT-PCR مقدار نسبی بیان ژن ها اندازه گیری شد. نتایج نشان داد که بیان ژن های مورد مطالعه در این تحقیق (Zp2، Gdf9، Bmp6 و Bmp15) در شرایط کشت دو بعدی و سه بعدی تفاوت معنی داری با شرایط in vivo نداشت. قطر فولیکول های کشت داده شده در محیط کشت سه بعدی تفاوت معنی داری با گروه کنترل نداشت، در حالی که تفاوت قطر فولیکول های کشت داده شده به صورت دو بعدی با گروه کنترل معنی دار می باشد (0.05>P). اگر چه از لحاظ بیان ژن تفاوتی بین گروه های کشت دو بعدی و سه بعدی وجود نداشت اما با در نظر گرفتن بهبود وضعیت مورفولوژی فولیکول ها در شرایط کشت سه بعدی نسبت به کشت دو بعدی، این نوع کشت می تواند گزینه ی مناسب تری جهت کشت آزمایشگاهی فولیکول ها باشد.
پژوهشگران	ساناز علایی (استاد راهنما)، اباصلت حسین زاده کلاگر (استاد راهنما)، راحله اسداله پور (دانشجو)