سلمان احمدی اسب چین

چکیده L -آسپاراژیناز (EC 3.5.1.1) یک آمیدوهیدرولاز است که می تواند هر دو آسپاراژین و گلوتامین را هیدرولیز کند. این آنزیم با مکانیسم اثر ضد توموری خود با تداخل در مسیرهای سیگنالینگ و بیان فاکتورهای رونویسی انکوژنیک را مهار می کند. این آنزیم به عنوان یک داروی زیستی و از مهم ترین داروهای کلیدی انکولوژیک در درمان لوسمی لنفوبلاستیک حاد و لنفوسارکوم محسوب می شود. برای جداسازی میکروارگانیسم های تولید کننده آنزیم L- آسپاراژیناز، در تاریخ 1/3/1401 از مجموعه پساب صنعتی شهرک صنعتی رودسر که مجموع کارخانجاتی ازجمله تولیدات فراورده های لبنی،محصولاتی کنسروی،مصنوعات فلزی،لاستیک و پلاستیک،مواد و محصولات شیمیایی بودند انجام گردید. در این نمونه برداری سعی شد از قسمت های غنی از پساب که احتمال حضور میکروارگانیسم های مولد L-آسپاراژیناز بسیار زیاد است انجام شود. برای کشت میکروارگانیسم ها از محیط های کشت نوترینت آگار و محیط اختصاصی M9 استفاده شد. پلیت های کشت داده شده به مدت 48 ساعت در دمای 30 درجه سانتی گراد گرماگذاری شدند. کلنی های تولید کننده L- اسپاراژیناز (1S1-1S2-2S2-3S2-4S2 ) برای شناسایی مولکولی وارد مرحله واکنش زنجیره پلی مرازی(PCR) شدند. در این مطالعه از بین 10 نمونه تهیه شده از پساب های صنعتی 4 سویه از 4 نمونه به عنوان سویه های برتر انتخاب شدند که دارای بالاترین فعالیت آنزیمی می باشد. سویه 4S2 به عنوان بیشترین تولید کننده آنزیم L-آسپاراژیناز شناخته شدند . برای شناسایی مولکولی 4 سویه جدا شده و به منظور تکثیر قطعه 16S rRNA انجام گرفت. با توجه به نتایج مشخص شده از تعیین توالی 16S rRNA 4 سویه، به ترتیب سویه 1S2 به باکتری Brachymonas denitrificans شباهت 97 درصدی، سویه 2S2 به باکتری Acinetobacter towneri شباهت 98 درصدی، سویه 3S2 به باکتری Acinetobacter towneri شباهت 99 درصدی و سویه 4S2 به باکتری Comamonas aquatica شباهت 100 درصدی دارد. شناسایی منابع میکروبی نقش مهمی در گسترش و تولید آنزیم L-آسپاراژیناز دارد. وجود این آنزیم نقش کلیدی در درمان بیمارانی سرطانی داشته و در آبنده با کلون سازی میکرارگانیسم های تولید آنزیم L-آسپاراژیناز کمک شایانی در درمان بیماران ناعلاج سرطانی می تواند داشته باشد.