اباصلت حسین زاده کلاگر

هدف این مطالعه بررسی ارتباط بین مقدار گونه های فعال اکسیژن(ROS)، گونه های فعال نیتروژن (RNS)، مالون دی آلدهید (MDA)، به عنوان نشانگر پراکسیداسیون لپید (LPO)، شکست DNA اسپرم (SDF)، و ظرفیت آنتی اکسیدانی کل (TAC)، با بیان پروتئین DJ-1 در مردان نابارور و مقایسه آنها با مقدار این نشانگرها در افراد بارور بود. علاوه بر این ما ارتباط بین پلی مورفیسم ژنی دو پلی مورفیسمg.-6_+10del (rs901561484) و g.168_185del (rs373653682) واقع در پروموتور ژن DJ-1 را با استعداد ابتلا به ناباروری مردان ارزیابی نمودیم. همچنین توالی CDS ژن DJ-1 از cDNA آن تکثیر و به صورت مستقیم توالی یابی شد تا گوناگونی های ژنتیکی این ناحیه از ژن DJ-1 نیز در مردان نابارور در مقایسه با افراد بارور مورد بررسی قرار گیرد. علاوه بر این، رابطه بین پلی مورفیسم های کاربردی XRCC5-VNTR، XRCC6 -61C>G و XRCC7 6721G>T که در فرآیند ترمیم شکست های دو رشته ای DNA درگیر هستند، با خطر ابتلا به ناباروری مردان بررسی شدند. مقدار بیان پروتئین DJ-1 در اسپرم افراد بارور و نابارور با استفاده از روش الایزا اندازه گیری شد. رادیکال های آزاد ROS/RNS در مایع سمن افراد بارور و نابارور اندازه گیری شدند. بررسی پلی مورفیسم های ، XRCC6 -61C>G و XRCC7 6721G>T به روش عمومی RFLP و پلی-مورفیسم های XRCC5-VNTR، DJ-1 g.-6_+10del و DJ-1 g.168_185del با استفاده از PCR صورت گرفت. اثرات مولکولی پلی مورفیسم های فوق روی ساختار RNA و پروتئین با استفاده از ابزارهای بیوانفورماتیکی جهت آنالیزهای in silico استفاده شد. میزان بیان پروتئین DJ-1 اسپرم و TAC در بیماران نابارور به طور معنی داری کمتر از مقادیر آنها در افراد بارور بود (p<0.0001). مقدار ROS/RNS، MDA و SDF در بیماران نابارور به طور معنی داری بیش از مقادیر آنها در افراد بارور بود (p<0.0001). یک ارتباط منفی بین غلظت DJ-1 با مقدار مقدار ROS/RNS، MDA و SDF وجود داشت. افراد حامل آلل D پلی-مورفیسم DJ-1 g.-6_+10del به طور معنی داری با خطر ابتلا به ناباروری در بیماران نابارور کل، AS و OAS ارتباط داشتند. علاوه بر این، آلل D این پلی مورفیسم نیز به طور معنی داری در گروه های نابارور کل، AS و OAS افزایش یافتند. همچنین، فراوانی ژنوتیپ های متفاوت و حاملین آلل Del و Dup پلی مورفیسم DJ-1 g.168_185del با ناباروری مردان در گ